产品描述
英文名称:Anti-TSACC antibody
中文名称:抗TSACC抗体
货号:STJ194378-200ug
规格:200 μg
本产品为 St John's Laboratory研发并生产的高特异性多克隆抗体。该抗体靶向人类 TSACC 蛋白的第57至107位氨基酸区域。TSACC 是一种在睾丸组织中高度表达、同时参与细胞凋亡调控的蛋白质,在生殖生物学、肿瘤发生及细胞信号转导研究中具有重要价值。
本抗体采用兔源免疫系统制备,通过亲和纯化工艺获得,确保高纯度与高特异性。适用于多种实验技术平台,包括但不限于 Western Blot(WB)、免疫沉淀(IP)、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)等。产品以冻干粉或液体形式提供(具体形式依批次而定)。

产品特点
1. Anti-TSACC 抗体(57-107 aa)具备多项显著优势,使其成为研究 TSACC 蛋白功能的理想工具。首先,该抗体针对 TSACC 蛋白 N 端保守结构域(57-107 aa)设计,该区域在进化上高度保守,且远离已知的翻译后修饰位点,从而避免因磷酸化、乙酰化等修饰导致的识别偏差,确保抗体在不同生理或病理状态下均能稳定结合目标抗原。
2. 本抗体采用高亲和力兔多克隆体系,经过多轮抗原免疫与血清筛选,最终通过抗原亲和层析纯化,获得高特异性与灵敏度。在 Western Blot 实验中,可清晰识别约 35 kDa 的 TSACC 蛋白条带,背景信号极低;在免疫荧光染色中,能精准定位 TSACC 在细胞质或特定亚细胞器中的分布,尤其适用于睾丸组织切片或生殖细胞系的研究。
3. 该抗体经过交叉反应性验证,确认对人源 TSACC 具有高度特异性,对小鼠、大鼠同源蛋白亦有良好识别能力(需参考具体批次数据),但对其他卷曲螺旋结构蛋白无明显交叉反应,有效避免假阳性结果。
4. 本产品提供灵活的包装规格(200 μg),适合中长期项目使用,且浓度适中,便于用户进行梯度稀释优化实验条件。产品附带详细的技术支持文档,并可通过 St John's Laboratory 渠道获取批次特异性验证数据,极大提升实验可重复性与数据可信度。
储存条件
为确保 Anti-TSACC 抗体(57-107 aa)的稳定性与活性,请严格按照以下储存条件操作:
1. 未开封产品应于 -20°C 长期保存,避免反复冻融。若产品以液体形式提供,建议分装成单次使用量(如 10–20 μL/管),并于 -20°C 冻存。每次使用前,将所需分装管置于冰上缓慢解冻,使用后立即放回 -20°C。严禁在 4°C 长期存放液体抗体超过一周,以免蛋白降解或聚集。
2. 若产品为冻干粉形式,请在收到后立即置于 -20°C 干燥环境中保存。复溶时,建议使用无菌 PBS(pH 7.4)或厂家推荐缓冲液,轻轻混匀至溶解(避免剧烈涡旋),复溶后抗体浓度通常为 1 mg/mL。复溶后的抗体可短期(≤1 周)存放于 4°C,长期仍需分装冻存于 -20°C。
3. 所有操作过程中应避免抗体接触强酸、强碱、有机溶剂或高浓度去垢剂(如 SDS >0.1%),以免破坏抗体构象。NaN₃作为防腐剂虽可抑制微生物生长,但对辣根过氧化物酶(HRP)有抑制作用,因此用于 HRP 标记二抗系统时,建议在使用前通过透析或脱盐柱去除 NaN₃,或选择不含防腐剂的批次。
工作原理
1. Anti-TSACC 抗体(57-107 aa)的工作原理基于抗原-抗体的高度特异性结合机制。TSACC 蛋白是一种含有卷曲螺旋结构域的细胞内蛋白,主要在睾丸生精细胞中表达,并在某些癌细胞中异常上调,参与调控线粒体介导的细胞凋亡通路。
2. 在 Western Blot 应用中,样品经 SDS-PAGE 分离后转膜,抗体与膜上固定化的 TSACC 蛋白结合,再通过酶标或荧光标记的二抗进行信号放大与检测,从而实现对 TSACC 表达水平的定量或半定量分析。
3. 在免疫沉淀(IP)实验中,该抗体可与 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠偶联,从细胞裂解液中特异性富集 TSACC 蛋白及其相互作用伙伴,用于后续质谱分析或共免疫沉淀验证蛋白互作网络。
4. 在免疫荧光(IF)或免疫组化(IHC)中,抗体穿透固定后的细胞或组织切片,与内源性 TSACC 结合,通过荧光或显色二抗可视化其亚细胞定位。研究表明,TSACC 主要定位于细胞质,但在凋亡早期可转位至线粒体外膜,本抗体可有效捕捉这一动态过程,为研究细胞死亡机制提供关键工具。
解决实验中的哪些问题
Anti-TSACC 抗体(57-107 aa)在多个研究场景中可有效解决关键实验难题:
1. TSACC 蛋白表达检测困难:由于 TSACC 在大多数组织中表达极低,仅在睾丸或特定肿瘤中高表达,常规抗体易出现信号弱或背景高问题。
2. 凋亡通路机制研究受限:TSACC 被证实可与 BAX、BCL2 等凋亡调控蛋白相互作用,但缺乏可靠工具阻碍机制解析。
3. 亚细胞定位不明确:部分文献报道 TSACC 存在于细胞核或线粒体,存在争议。本抗体经 IF 验证,可清晰显示其在正常与凋亡细胞中的定位差异,帮助厘清其功能场所。
4. 种属交叉反应不确定:许多商用抗体仅验证人源,限制动物模型应用。本产品经序列比对与实验验证,对小鼠、大鼠 TSACC 同源蛋白具有良好识别能力(同源性 >85%),适用于转基因或敲除小鼠模型研究。
5. 批次间差异导致数据不可重复:St John's Laboratory 实施严格的 QC 流程,每批抗体均提供验证数据,确保实验可重复性,避免因抗体质量问题浪费宝贵样本与时间。
6. 低丰度蛋白检测灵敏度不足:在 WB 中,即使 TSACC 表达量极低(<1 ng),本抗体仍可产生可检测信号,配合 ECL 超敏底物,显著提升检测下限。
使用方法
· Western Blot(WB)
1. 样品制备:使用 RIPA 裂解液提取总蛋白,测定浓度(BCA 法),加入上样缓冲液煮沸 5 分钟。
2. 电泳与转膜:按常规 SDS-PAGE 分离蛋白,湿转或半干转至 PVDF 膜。
3. 封闭:5% 脱脂奶粉/TBST 室温封闭 1 小时。
4. 一抗孵育:用 TBST 稀释抗体,4°C 孵育过夜或室温 2 小时。
5. 洗涤:TBST 洗 3×10 分钟。
6. 二抗孵育:HRP 标记抗兔 IgG,室温 1 小时。
7. 显影:ECL 化学发光,X 光片或成像系统检测。
· 免疫荧光(IF)
1. 细胞固定:4% 多聚甲醛室温固定 15 分钟,PBS 洗 3 次。
2. 透化:0.1% Triton X-100/PBS 室温 10 分钟(如需检测胞内抗原)。
3. 封闭:5% BSA/PBS 室温 1 小时。
4. 一抗孵育:抗体稀释于 1% BSA/PBS(1:200–1:500),4°C 过夜。
5. 洗涤:PBS 洗 3×5 分钟。
6. 二抗孵育:荧光标记抗兔 IgG(如 Alexa Fluor 488,1:1000),避光室温 1 小时。
7. 核染与封片:DAPI 染核,抗荧光淬灭封片剂封片,共聚焦显微镜观察。
· 免疫沉淀(IP)
1. 预澄清:细胞裂解液与 Protein A/G 珠 4°C 旋转 1 小时,离心取上清。
2. 抗体结合:加入 2–5 μg 抗体,4°C 旋转 2 小时。
3. 加珠:加入 20 μL Protein A/G 磁珠,4°C 旋转过夜。
4. 洗涤:冷裂解液洗 4–5 次。
5. 洗脱:SDS 上样缓冲液 95°C 5 分钟,用于 WB 或质谱。
常见问题与解决方案
问题一:Western Blot 无信号或信号极弱
可能原因包括抗体稀释度过高、样品中 TSACC 表达量过低、转膜效率差或抗原表位被遮蔽。建议首先确认样品来源是否为 TSACC 高表达组织;其次尝试降低稀释比;检查转膜;若使用甲醛固定的样品,需进行抗原修复。
问题二:非特异性条带或高背景
常见于封闭不充分、一抗浓度过高或洗涤不干净。建议延长封闭时间至 2 小时,使用 5% BSA 替代奶粉;降低抗体浓度;增加 TBST 洗涤次数与时间;确保二抗无非特异结合(设置无一抗对照)。
问题三:免疫荧光染色呈弥漫性或核定位错误
可能因透化过度导致蛋白泄漏,或固定不充分。建议优化透化时间,使用新鲜配制的多聚甲醛;设置同型对照排除非特异结合;确认 TSACC 文献报道的定位。
问题四:IHC 染色阴性
组织中 TSACC 表达本身较低,或抗原修复不足。建议使用阳性对照组织;尝试不同抗原修复方法;延长一抗孵育时间至 48 小时。
问题五:IP 实验未富集到目标蛋白
可能因抗体无法识别天然构象 TSACC,或裂解条件过于剧烈破坏蛋白复合物。建议使用温和裂解液;验证抗体是否适用于 IP;增加抗体用量至 10 μg;设置 Input 对照确认表达。
问题六:抗体沉淀或浑浊
可能因冻融不当或污染。建议离心(12,000 rpm, 5 分钟)取上清使用;若持续浑浊,联系技术支持。
免责声明
1. 本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,仅个人观点,具体以品牌信息文档为准。
2. 本产品由 St John's Laboratory 研发生产,仅供科学研究使用,不得用于任何临床诊断、治疗、预防疾病或商业用途。
3. St John's Laboratory 已尽努力确保产品信息的准确性与可靠性,包括序列信息、应用验证及性能数据。
4. 本产品受知识产权保护,未经书面许可,不得用于反向工程、转售或制造仿制品。如对产品有任何疑问,请联系技术支持邮箱或访问获取资料。
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