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一、产品描述
英文名称：Rat C3 (Complement C3) Sandwich ELISA Kit
中文名称：大鼠补体C3夹心酶联免疫吸附测定试剂盒
品牌：St John's Laboratory
货号：STJE0005616
产品规格： 96T
St John's Laboratory 品牌推出的 大鼠补体C3（Complement C3）夹心ELISA试剂盒，专为科研用途设计，用于定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中补体C3（Complement C3）蛋白的浓度。本试剂盒采用高特异性单克隆抗体包被微孔板，结合生物素-亲和素放大系统，确保检测结果具有高度灵敏性、重复性和准确性。该产品适用于基础医学研究、免疫学研究、炎症机制探索、药物筛选及毒理学评估等领域，是研究大鼠体内补体系统激活状态的重要工具。
二、产品特点
本试剂盒具备多项显著优势，使其在同类产品中脱颖而出：
1. 高灵敏度：检测下限可达15.6 pg/mL，能够准确捕捉低浓度样本中的C3蛋白变化，适用于早期炎症或轻微免疫激活状态的研究。
2. 高特异性：采用针对大鼠C3蛋白N端或关键功能区域的单克隆捕获抗体与检测抗体组合，有效避免与其他补体成分或非特异性蛋白的交叉反应。
3. 操作简便：采用经典的夹心ELISA流程，无需复杂设备，常规实验室即可完成，整个实验可在4–5小时内完成。
4. 良好的重复性：批内变异系数（CV）<10%，批间变异系数<15%，确保实验数据的高度可重复性。所有组分经优化配方处理，在推荐储存条件下可长期保持活性。
5. 样本类型兼容性强：适用于大鼠血清、EDTA/肝素抗凝血浆及细胞培养上清等多种样本类型，适应不同实验设计需求。
三、储存条件
为确保试剂盒性能稳定，请严格按照以下条件储存：
· 未开封的试剂盒应于 2–8°C 冰箱中避光保存，切勿冷冻。
· 开封后，微孔板条需立即放回原铝箔袋中，加入干燥剂并密封，于2–8°C保存，并在 1周内使用完毕。
· 标准品为冻干粉，使用前需按说明书要求用标准品稀释液复溶，复溶后可分装并于 -20°C 冻存，避免反复冻融，建议在 1个月内使用完毕。
· 酶标工作液、生物素化检测抗体等液体组分开封后应于 2–8°C 保存，并在 7天内使用完毕。
· 显色底物（TMB）对光敏感，使用后应立即盖紧瓶盖，避光保存于2–8°C。
· 终止液（1M H₂SO₄）具有腐蚀性，应远离儿童存放，并避免接触皮肤或眼睛。
· 所有试剂在使用前应恢复至室温（约20–25°C），以避免冷凝水影响实验结果。
若储存条件不符合要求，可能导致抗体失活、酶活性下降或标准曲线偏移，从而影响检测准确性。
四、工作原理
本试剂盒基于 夹心酶联免疫吸附测定法（Sandwich ELISA） 原理进行定量检测。具体步骤如下：
首先，微孔板已预先包被了针对大鼠补体C3蛋白的高亲和力单克隆捕获抗体。当加入待测样本（如血清、血浆或细胞上清）后，样本中的C3蛋白会特异性地与包被抗体结合，形成“抗体–抗原"复合物。随后，加入生物素标记的检测抗体，该抗体识别C3蛋白上的另一表位，从而形成“捕获抗体–C3抗原–生物素化检测抗体"的三明治结构。接着，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素（Streptavidin-HRP），其与生物素高亲和力结合，形成完整的检测复合物。最后，加入TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）显色底物，在HRP催化下产生蓝色反应产物，颜色深浅与样本中C3浓度成正比。加入终止液（1M硫酸）后，反应终止，溶液由蓝变黄，使用酶标仪在450 nm波长（参考波长630 nm）下测定吸光度（OD值）。通过绘制标准曲线，即可计算出各样本中C3的精确浓度。
该方法具有双重抗体识别机制，极大提高了检测的特异性和灵敏度，有效排除样本中其他蛋白的干扰。
五、解决实验中的哪些问题
本试剂盒有效解决了以下实验痛点：
1. 无法实现高通量定量：相比WB等半定量方法，ELISA可同时处理多达96个样本，适合大规模筛选实验。
2. 样本处理复杂：本试剂盒兼容多种样本类型，无需复杂前处理，简化实验流程。
3. 数据重复性差：由于采用标准化生产与严格质控，本产品批间差异小，保障实验可重复性，提升论文数据可信度。试剂盒提供高纯度重组大鼠C3标准品，确保标准曲线准确可靠。
4. 实验周期长：整个检测流程可在一天内完成，加速研究进度。
5. 成本高昂：相比质谱或流式细胞术，ELISA成本更低，适合经费有限的实验室。
因此，本产品特别适用于研究糖尿病肾病、类风湿关节炎、败血症、肝脏损伤、神经退行性疾病等与补体激活密切相关的疾病模型中C3的动态变化。
六、使用方法
实验前准备：
将所有试剂从冰箱取出，平衡至室温（20–25°C）至少30分钟。
准备好所需数量的微孔板条，其余密封保存。
按说明书配制洗涤缓冲液（1×）：将浓缩洗涤液（20×）用去离子水按1:19稀释。
复溶标准品：用标准品稀释液溶解冻干标准品，配制成1000 pg/mL母液，再进行系列稀释（如1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625 pg/mL及零标准）。
操作步骤：
1. 加样：向微孔中分别加入100 μL标准品或待测样本（建议设置复孔），轻敲板架混匀。
2. 孵育：37°C孵育90分钟。
3. 洗涤：弃去孔内液体，每孔加入350 μL 1×洗涤液，静置30秒后吸干，重复洗板4次，最后拍干。
4. 加检测抗体：每孔加入100 μL生物素化检测抗体工作液，37°C孵育60分钟。
5. 再次洗涤：同上，洗板4次。
6. 加酶标液：每孔加入100 μL Streptavidin-HRP工作液，37°C避光孵育30分钟。
7. 第三次洗涤：洗板5次，去除未结合酶标物。
8. 显色：每孔加入100 μL TMB显色底物，37°C避光孵育15–20分钟（根据颜色深浅调整时间）。
9. 终止反应：每孔加入50 μL终止液，轻轻震荡混匀。
10. 读数：在加入终止液后30分钟内，使用酶标仪在450 nm主波长、630 nm参考波长下测定OD值。
数据分析：
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制四参数逻辑（4-PL）或线性标准曲线。
根据样本OD值代入曲线方程，计算C3浓度。
若样本OD值超出标准曲线范围，需对样本进行适当稀释后重测。
注意事项：
避免孔间交叉污染，使用多通道移液器时注意更换枪头。
洗涤务必干净，残留液体会导致背景升高。
显色时间不宜过长，防止信号饱和。
所有操作应在洁净环境中进行，避免灰尘或气溶胶污染。
七、常见问题与解决方案
在使用本试剂盒过程中，用户可能遇到以下问题，现提供详细解答：
1. 若标准曲线线性不佳或R²值低于0.99，可能是标准品复溶不充分、稀释操作误差或显色时间不当所致，建议重新配制标准品，使用校准过的移液器，并严格控制显色时间。
2. 若样本OD值普遍偏低，可能因样本中C3浓度过低或样本保存不当导致蛋白降解，建议检查样本采集与冻存条件，必要时浓缩样本或使用更高灵敏度检测方法。
3. 若背景值过高（零标准OD > 0.1），通常由洗涤不充分、酶标液残留或TMB污染引起，应增加洗涤次数至5–6次，并确保每次吸干；同时检查TMB是否被金属离子污染。
4. 若复孔间差异大（CV > 15%），多因加样不均或孵育温度波动，建议使用多通道移液器，并确保孵育箱温度均匀稳定。
5. 若出现“钩状效应"（高浓度样本OD反而降低），说明抗原过量导致抗体饱和，此时应将样本进行更高倍数稀释后重测。
6. 若试剂盒开封后短期内性能下降，可能因储存不当（如反复冻融、高温暴露），请严格按说明书条件保存未用组分。
7. 若显色后颜色迅速褪去，可能是终止液加入不及时或TMB失效，应确保显色后立即加终止液，并检查TMB有效期。
8. 若微孔板边缘孔信号异常（边缘效应），建议使用带盖孵育盒或在孵育时加入空白缓冲液至外圈孔以减少蒸发影响。
9. 若客户使用非推荐样本类型，可能出现干扰物质影响结果，建议进行样本预处理（如离心、过滤、稀释）或做加标回收实验验证准确性。
10. 若实验结果与预期不符，建议同步检测阳性对照以验证系统有效性，并排查抗体特异性或样本处理问题。
八、免责声明
1. 本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，仅个人观点，具体以品牌信息文档为准。
2. 本产品仅限科研使用，不得用于临床诊断、治疗或预防用途。
3. St John's Laboratory 及其代理商不对因误用、不当储存、违反操作规程或超出适用范围使用本产品所导致的任何直接或间接损失承担责任。
4. 用户应自行验证试剂盒在其特定实验体系中的适用性，并对实验数据的解释负全责。
5. 产品性能基于出厂时的测试条件，实际结果可能因实验室环境、操作人员技能、样本质量等因素而有所差异。
关键词：大鼠C3 ELISA试剂盒、补体C3检测试剂盒、St John's Laboratory ELISA、STJE0005616、大鼠补体C3定量、夹心ELISA试剂盒、96T ELISA kit、大鼠血清C3检测、免疫学研究试剂、炎症标志物ELISA、补体系统检测、高灵敏度ELISA、科研用ELISA试剂盒、大鼠C3蛋白测定、ELISA标准曲线、生物素-亲和素ELISA、补体激活研究、动物模型C3检测、ELISA操作指南、St John's Laboratory 中国代理
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（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）
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STJ194640-20ug | Anti-SLC25A44 antibody (237-287 aa) (STJ194640) | 20ug | stjohnslabs |
STJA0010492-100uL | Anti-METTL3 antibody [SM0492] (STJA0010492) | 100uL | stjohnslabs |
STJA0010492-50uL | Anti-METTL3 antibody [SM0492] (STJA0010492) | 50uL | stjohnslabs |
STJ91682-20ug | Anti-ARHGAP18 antibody (517-566 aa) (STJ91682) | 20ug | stjohnslabs |
STJ193511-20ug | Anti-ERFE antibody (102-152 aa) (STJ193511) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194894-100ug | Anti-SAMD5 antibody (66-116 aa) (STJ194894) | 100ug | stjohnslabs |
STJ91023-50ug | Anti-Phospho-TH-Ser19 antibody (10-59 aa) (STJ91023) | 50ug | stjohnslabs |
STJ116041-20uL | Anti-STIP1 antibody (1-300) (STJ116041) | 20uL | stjohnslabs |
STJ11101223-20uL | Anti-STIP1 antibody (2-98) [S3MR] (STJ11101223) | 20uL | stjohnslabs |
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STJ96208-20ug | Anti-USP48 antibody (631-680 aa) (STJ96208) | 20ug | stjohnslabs |
STJ197447-20ug | Anti-STIP1 antibody (250-300 aa) (STJ197447) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194616-20ug | Anti-SWI5 antibody (185-235 aa) (STJ194616) | 20ug | stjohnslabs |
STJ194162-20ug | Anti-SFR1 antibody (110-160 aa) (STJ194162) | 20ug | stjohnslabs |
STJ90953-20ug | Anti-Phospho-OXSR1-Thr185 antibody (151-200 aa) (STJ90953) | 20ug | stjohnslabs |
STJ11103260-100uL | Anti-Hivep3 antibody (617-714) (STJ11103260) | 100uL | stjohnslabs |
STJ180567-0.1mLC | Anti-EGFR antibody (344-492aa) [ZR16] (STJ180567) | 0.1mLC | stjohnslabs |
STJ193581-50ug | Anti-CARS2 antibody (95-145 aa) (STJ193581) | 50ug | stjohnslabs |
STJ95732-100ug | Anti-SOS2 antibody (631-680 aa) (STJ95732) | 100ug | stjohnslabs |
STJ195130-100ug | Anti-TMEM242 antibody (53-103 aa) (STJ195130) | 100ug | stjohnslabs |
STJA0006233-200ug | Anti-TFRC antibody (100-200) [PT0719] (STJA0006233) | 200ug | stjohnslabs |
STJ194336-20ug | Anti-CFAP58 antibody (723-773 aa) (STJ194336) | 20ug | stjohnslabs |
STJ72312-100ug | Anti-UCHL1 antibody (58-68) (STJ72312) | 100ug | stjohnslabs |
STJ115093-100uL | Anti-SCD5 antibody (1-75) (STJ115093) | 100uL | stjohnslabs |
STJ11102516-100uL | Anti-CARD11 antibody (1055-1154) [S6MR] (STJ11102516) | 100uL | stjohnslabs |
STJ194151-100ug | Anti-CFAP144 antibody (7-57 aa) (STJ194151) | 100ug | stjohnslabs |
STJ194519-20ug | Anti-SWSAP1 antibody | 20ug | stjohnslabs |
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STJ91966-100ug | Anti-CDH26 antibody (30-110 N-Term) (STJ91966) | 100ug | stjohnslabs |
STJ196476-50ug | Anti-Phospho-CTNNA1-Ser652 antibody (STJ196476) | 50ug | stjohnslabs |
STJ95867-100ug | Anti-TAS1R3 antibody (300-380 Internal) (STJ95867) | 100ug | stjohnslabs |
STJ24829-100uL | Anti-NTF3 antibody (19-257) (STJ24829) | 100uL | stjohnslabs |
STJ117637-100uL | Anti-KMT5B antibody (100-200) (STJ117637) | 100uL | stjohnslabs |
STJ193598-20ug | Anti-TMEM151B antibody (366-416 aa) (STJ193598) | 20ug | stjohnslabs |
STJ113053-200uL(2x100uL) | Anti-NOX4-antibody (aa328-578) | 200uL(2x100uL) | stjohnslabs |
STJ71686 | Anti-TROP2 Antibody | 100ug | stjohnslabs |
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STJ117637-20uL | Anti-KMT5B antibody (100-200) (STJ117637) | 20uL | stjohnslabs |
STJ195941-50ug | Anti-TECPR2 antibody (598-648 aa) (STJ195941) | 50ug | stjohnslabs |
STJ193829-20ug | Anti-TRIM50 Antibody | 20ug | stjohnslabs |
STJ116312-100uL | Anti-NMU antibody (35-174) (STJ116312) | 100uL | stjohnslabs |
STJ11107673-20ul | Anti-Phospho-Rptor-S791 antibody | 20ul | stjohnslabs |
STJ116312-20uL | Anti-NMU antibody (35-174) (STJ116312) | 20uL | stjohnslabs |
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